1. Resumen del trabajo realizado hasta la fecha
En los primeros meses de trabajo del laboratorio en relación al proyecto de investigación financiado por la Beca IHA21, hemos concentrado nuestro interés en demostrar que el efecto combinado de la inhibición de dos proteínas relacionadas con la activación del sistema inmune distintas, resulta en un efecto antitumoral mucho mayor que la inhibición aislada de cada una de ellas, en un modelo murino de cáncer de pulmón. Para ello, hasta el momento se han empleado más de 50 ratones en distintas cohortes terapéuticas comparando grupos de tratamiento con suero fisiológico (placebo), tratamiento anti-PD1 de forma aislada. Además, en algunos grupos de ratones se inyectaron células tumorales LL3 parentales y en otros células tumorales tras silenciamiento del gen Id1. Finalmente, se emplearon ratones con dos genotipos distintos, los silvestres para Id1 y los deficientes para Id1. Se realizaron experimentos combinando los distintos tipos de células inyectados, los distintos genotipos del ratón y la administración de placebo frente a un anticuerpo monoclonal frente a PD-1. Tras el desarrollo de los tumores subcutáneos se administraron los tratamientos y tras comprobar la actividad antitumoral en las distintas cohortes, se sacrificó a los animales para el estudio inmunohistoquímico de los tejidos. En ellos se estudió la presencia de linfocitos T CD3 +, macrófagos infiltrantes de tumor CD68 + así como la expresión de PD1
y PD-L1.
2. Resultados preliminares
De esta forma, hemos confirmado que el efecto sinérgico de la inhibición combinada de Id1 y PD-1 logró los mejores resultados antitumorales en dicho modelo animal de cáncer de pulmón logrando respuestas tumorales marcadas y mantenidas. Esta respuesta del tumor al tratamiento combinado además se tradujo en un incremento de la supervivencia de dichos ratones (figura). Además, se ha podido comprobar que la respuesta antitumoral lograda por el abordaje combinado depende directamente de la activación de la respuesta inmune mediante el incremento de los linfocitos infiltrantes de tumor en el lecho tumoral. Estos hallazgos han permitido confirmar la hipótesis inicial del proyecto por lo que se están en estos momentos diseñando nuevos experimentos para generar un inhibidor farmacológico de Id1 y conocer mejor las características de la activación de la respuesta inmune y cómo mejorar dicha activación. Se está preparando igualmente un modelo murino de enfermedad metastásica para conocer el efecto antitumoral de la estrategia de bloqueo combinado.
3. Figura.
En el gráfico de la izquierda se observa el marcado efecto antitumoral sobre el volumen del tumor en ratones que reciben tratamiento combinado mediante un fármaco anti-PD-1 además de la inhibición de la expresión de Id1 (línea roja). Igualmente, en la figura de la derecha se observa cómo la supervivencia de los ratones que reciben el tratamiento combinado presentan además una mayor supervivencia.
4. Comunicaciones Presentadas en Congresos Internacionales:
– ASCO-SITC. Clinical Immuno-oncology Symposium 2018
Combined inhibition of PD-1 and Inhibitor of Differentiation-1 (Id1) impairs tumor growth and improves survival by increasing tumor-infiltrating lymphocytes (TIL) in a lung cancer model. Ignacio Gil-Bazo, Marta Roman, Iosune Baraibar, Ines Lopez, Enrique Fraile, Christian Rolfo, Silve Vicent, Alfonso Calvo, Juan José Lasarte, Daniel Ajona. San Francisco, 25-27 de Enero 2018.
– IASLC Lung Cancer Immunotherapy Meeting 2018
PD-1 and ID-1 Inhibition Impacts Tumor Growth and Survival by Increasing Tumor Immune-Related Cells in Lung Cancer. Ignacio Gil-Bazo, Marta Roman, Iosune Baraibar, Ines Lopez, Christian Rolfo, Alfonso Calvo, Silve Vicent, Daniel Ajona. Madrid, 22-24 de Marzo, 2018.
– ASCO Annual Meeting 2018
Effect of anti-PD-1 and anti-Id-1 combo on tumor response and survival in lung cancer. Iosune Baraibar, Marta Roman, Ines Lopez, Daniel Ajona, Alfonso Calvo, Elisabeth Guruceaga, Jesús Corral, Juan José Lasarte, Silvestre Vicent, Ignacio Gil-Bazo. Chicago, 1-5 de Junio, 2018.
5. Financiación adicional concedida en base a los resultados preliminares
En base a los resultados preliminares obtenidos en el trabajo experimental realizado en los primeros meses del proyecto gracias a la financiación aportada por la Beca IHA21, se solicitaron y lograron durante 2017 las siguientes ayudas adicionales para la misma línea de investigación:
-Título: “Nueva estrategia terapéutica para evitar el escape inmune en cáncer de pulmón
metastásico mediante el bloqueo combinado de PD-1 e Id1”.
Agencia Financiadora: Departamento de Salud. Gobierno de Navarra.
Plazo de realización: 15/12/2017-15/12/2020.
Cantidad concedida: 90.000€.
Investigador principal: Ignacio Gil Bazo
– Título: Nueva estrategia terapéutica para evitar el escape inmune en cáncer de pulmón
metastásico mediante el bloqueo combinado de PD-1 e Id1”.
Agencia Financiadora: Fundación Merck Salud 2017.
Plazo de realización: 15/09/2017-15/09/2019.
Cantidad concedida: 30.000€.
Investigador principal: Ignacio Gil Bazo.